Amin'ny laboratoara analalana,Chromatography ranon-javatra avo lenta (HPLC)dia teknika tena ilaina amin'ny fisarahana, ny fampahafantarana ary ny fitambarany. Na izany aza, ny fanatanterahana ny valiny tsy miovaova sy azo itokisana dia mitaky mihoatra noho ny fitaovana mety fotsiny - izany dia mitakyOptimization. Ity lahatsoratra ity dia mandinika ny fomba hanatsarana ny anaoHPLC AnalysisMba hanamafisana ny fahombiazan'ny fahombiazana, manamaivana ny fihenam-bidy ary hanatsarana ny fahitsiana.
Fanamby mahazatra amin'ny famakafakana HPLC sy ny fomba hamahana azy ireo
Raha i HPLC dia fitaovana famakafakana mahery vaika, tsy misy fanamby izany. Olana toy nyFanapahan-kevitra ratsy, ny tabataba na ny valiny tsy mifanarakaafaka manakana ny fahombiazan'ny laboratoara. Ity misy fomba hamahana ireo olana iraisana ireo:
1. Fanapahan-kevitra ratsy
Ny iray amin'ireo olana mahazatra indrindra amin'ny HPLC dia ny fisarahana tsy eo amin'ny tendrony, matetika noho nyNy fisafidianana tsanganana diso na ny tahan'ny fikorianan-tsolika. Manatsara ny fanapahan-kevitra:
• Misafidiana aTsanganana Chromatographicmiaraka amin'ny metyhaben'ny dingana sy habe sombinyho an'ny vadinao.
• amboaryFlow rate sy toe-javatra gradienthanamafisana ny haingam-pandeha sy ny fisarahana.
• AmpiasaoFifehezana ny mari-panahanamafisana ny fitazonana fotoana ary hanatsarana ny famerenany.
2. Baseline discift na tabataba
Ny tabataba basetine dia mety hanelingelina ny fametahana ny peak sy ny fampandihizana ny data marim-pototra. Ity resaka ity dia matetika vokatry ny:
•Fihenan'ny mari-pana- mitazona tontolo iainana azo antoka ary mampiasa lafaoro iray raha ilaina.
•Fizarana finday voaloto- Mampiasà solika avo lenta ary manivana ny pejinao findainao alohan'ny hampiasana.
•Fitaovana famotehana- madio tsy tapaka sy mihazona ilay detector, pump, ary tony mba hampihenana ny feo.
3. Inconction Peak Integration
Ny fampidirana tsy mitombina dia misy fiantraikany amin'ny maha-azo itokisana ny habetsaky ny habe. Mba hamahana izany:
• hiantoka nyNy tsanganana HPLC dia misy fepetra tsaraalohan'ny fampiasana.
• mitazona atahan'ny fikorianan-javatraary misoroka ny fihenan'ny tsindry.
• optimizeSettings rindrambaiko ho an'ny fampidirana Peak, miantoka ny vokatra tsy tapaka sy azo averina.
Misafidy ny tsanganana HPLC mety
Ny fisafidianana ny tsanganana HPLC marina diaZava-dehibe amin'ny fanatanterahana ny fisarahana tsara indrindra. Diniho ireo antony ireo rehefa misafidy tsanganana:
•Ny halavan'ny tsanganana: Ny tsanganana lava kokoa dia manome fisarahana tsara kokoa fa mampitombo ny fotoana famakafakana. Misafidiana ny halavany izay mandanjalanja ny vahaolana sy ny hafainganana.
•Diameter tsanganana: Ny tsanganana narrosa dia manome vahaolana avo kokoa fa mitaky fanerena bebe kokoa. Hamarino tsara ny rafitra HPLC.
•Phase: Misafidiana dingana miaraka amin'ny simika mety ho an'ny famakafakanao (ohatra, C18 ho an'ny sombin-tsokosoko tsy misy polar, phenyl ho an'ny sokatra manitra).
Manatsara ny fomba finday sy ny tahan'ny fiakarana
Ny dingana finday dia fanalahidy amin'ny famakafakana HPLC mahomby. Ity ny fomba hanatsarana azy:
•Amboary ny famoronana solvent: Tsara-tsaraSolosaina solventhanatsarana ny fisarahana. AmpiasaoElisitra Gradientho an'ny santionany santionany.
•Mifehy ny ambaratonga PH: Hiantoka nyMobile Phase Phmifanentana amin'ny santionany sy ny tsanganana.
•Optimize rate range: Ny tahan'ny fikorotanana avo kokoa dia mampihena ny fotoana famakafakana fa mety hampandefitra ny fanapahan-kevitra. Ny haingam-pandeha sy ny fahombiazan'ny fifandanjana miorina amin'ny fomba ataonao.
Fikojakojana sy fikarakarana fisorohana
Ny fikojakojana tsara dia miantokafampisehoana tsy miovaova ary manitatra ny zavamaneno zavamaneno. Araho ireto fomba fanao tsara indrindra ireto:
•Fanadiovana mahazatra: Manadio tsy tapaka nyinjector, tsanganana ary mpitsikilohisorohana ny fandotoana.
•Manolo ny fatiantoka: Fanovanatombo-kase, sivana ary tubingraha ilaina mba hisorohana ny fihenam-bidy sy ny fihenan'ny tsindry.
•Calibrate ny rafitra: Mpitondra calibrate tsy tapaka sy ny singa manakiana hafa mba hahazoana antoka ny valiny marina.
Famaranana
Ny famakafakana HPLC HPLC dia tena ilaina amin'ny fanatsarana ny fahombiazan'ny laboratoara ary hiantoka ny valiny avo lenta. Amin'ny famahana ireo olana mahazatra toy nyFanapahan-kevitra tsy mahomby, ny tabataba baseline, ary ny tsy fitovian-kevitra, ary amin'ny fisafidianana ny tsaraTsanganana sy finday, azonao atao ny manatsara ny fampisehoana an-tsarinao. MPISAVAFikojakojana sy fomba fitandremana tsaraHihazona ny rafitra HPLC anao mihazakazaka amin'ny fahombiazan'ny haingam-pandeha, manamaivana ny fiakarana ary ny fiantohana valiny marina sy azo averina.
Ho an'ny fitarihana manam-pahaizana mombaHPLC Optimization, fifandraisanaChromasir-Misy manam-pahaizana manokana amin'ny fanomezanaVahaolana chromatography namboarinaMba hanampiana ny laboratoara dia hahatratra ny fenitra ambony indrindra amin'ny fampisehoana.
Paositra: Mar-27-2025